Помещения для проведения полимеразной цепной реакции (далее – ПЦР) исследований с патогенными биологическими агентами (далее – ПБА) I–II групп патогенности, вызывающими особо опасные инфекционные заболевания, имеют три зоны, которые соответствуют этапам ПЦР-анализа:
- боксированное помещение с предбоксом (шлюзом) и боксом биологической безопасности (далее – БББ) II класса для приготовления реакционной смеси;
- боксированное помещение с предбоксом (шлюзом) и БББ II класса для выделения дезоксирибонуклеиновой кислоты (рибонуклеиновой кислоты) (далее – ДНК (РНК));
- боксированное помещение с предбоксом (шлюзом) для проведения амплификации.
Помещения для проведения ПЦР-исследований с ПБА II–IV групп патогенности, вызывающими инфекционные и (или) паразитарные заболевания, имеют три зоны, которые соответствуют этапам ПЦР-анализа:
- боксированное помещение с БББ II класса для приготовления реакционной смеси;
- боксированное помещение с предбоксом (шлюзом) и БББ II класса для выделения ДНК (РНК);
- помещение для проведения амплификации.
При использовании анализатора закрытого типа, предусматривающего процесс смешивания реакционной смеси с нуклеиновой кислотой и амплификацию, помещения для проведения ПЦР-исследований имеют две зоны. В предбоксах (шлюзах) устанавливаются зеркало, раковины для мытья рук или рукомойники. При их отсутствии используются кожные антисептики и емкости с дезинфицирующими растворами. Для обеспечения биологической защиты при проведении исследований методом ПЦР соблюдается следующее:
- каждая зона имеет свой набор мебели, холодильников, морозильников, лабораторного оборудования, реагентов, автоматических пипеток (дозаторов), наконечников, пластиковой и стеклянной посуды, защитных костюмов, одноразовых перчаток без талька, уборочного инвентаря и расходного материала, используемых только в данной комнате;
- не допускается повторное использование одноразовых наконечников и посуды, а также перенос оборудования, расходных материалов, реактивов, перчаток и халатов из одного помещения в другое;
- вся работа по ПЦР проводится в одноразовых перчатках без талька, которыми обеспечивается каждый этап работы;
- отделка всех помещений для проведения ПЦР выполняется материалами, устойчивыми к действию моющих и дезинфицирующих средств;
- во всех помещениях устанавливаются бактерицидные облучатели;
- при проведении детекции методом электрофореза данный этап обслуживается отдельным персоналом;
- условия хранения реагентов для проведения всех этапов ПЦР соответствуют требованиям инструкции производителя по применению реагентов. Клинические образцы хранятся отдельно от реагентов;
- оптимальная температура в помещении для ПЦР-исследований поддерживается в пределах от плюс 18 °С до плюс 22 °С, относительная влажность — от 40 % до 70 %, если иное не предусмотрено методикой исследования. Следует вести документацию с отметкой температурного режима и влажности;
- реагенты не хранятся в боксированном помещении для выделения или амплификации. Пробы не хранятся в комнате для приготовления реакционной смеси.
Автор - Алпысбайұлы Касымхан, руководитель Департамента санитарно-эпидемиологического контроля города Алматы - Главный государственный санитарный врач города Алматы